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2015, 32(10):914-920.doi:10.13213/j.cnki.jeom.2015.14743

三甲基腺嘌呤和雷帕霉素对染尘大鼠肺巨噬细胞自噬及凋亡的影响


收稿日期: 2014-10-27;  发布日期: 2017-06-24

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81202161)

通信作者: 金玉兰, Email: 1241797044@qq.com  

作者简介: 时亚欣(1987-),女,硕士生;研究方向:劳动卫生与环境卫生,E-mail:719459801@qq.com

[目的] 观察三甲基腺嘌呤(3-MA)和雷帕霉素对染尘大鼠肺巨噬细胞自噬活动的调控以及对细胞凋亡的影响。

[方法] 120 只雄性Wistar 大鼠均采取非暴露气管滴注的方法一次性灌注50 mg/mL SiO2 粉尘进行染毒, 然后随机分为3 组:对照组、3-MA组和雷帕霉素组。其中后两组以1.5 mg/(kg& #183;d)和2 μg/(kg& #183;d)的剂量腹腔注射3-MA或雷帕霉素, 隔日给药持续28 d, 3-MA组和雷帕霉素组大鼠分别在染毒7、14、28、60、90 d 处死, 收集其肺灌洗液, 离心获取肺巨噬细胞, 测定其凋亡率。采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标志性蛋白微管相关蛋白1 轻链3(LC3)及自噬调控蛋白Beclin1。

[结果] 雷帕霉素组大鼠染尘不同时间LC3 蛋白表达均增加且比对照组高;5 个观察时点大鼠肺巨噬细胞凋亡率分别为(1.74& #177;0.73)%、(1.25& #177;0.35)%、(1.44& #177;1.24)%、(3.70& #177;1.51)%、(36.98& #177;11.91)%与对照组(5.63& #177;1.01)%、(4.95& #177;0.63)%、(4.10& #177;0.43)%、(6.75& #177;4.19)%、(30.23& #177;11.05%)相比, 除90 d 高于对照组低(P < 0.05), 其他各时期均比对照组低;3-MA组在给药期间LC3 蛋白表达比对照组低, 停药后蛋白表达有所增高, 90 d 时蛋白表达水平与对照组接近;而该组肺巨噬细胞的凋亡率为(2.86& #177;1.13)%、(8.80& #177;0.28)%、(6.84& #177;1.29)%、(2.54& #177;1.65)%、(37.22& #177;16.22)%, 7 d 时凋亡率低于其他时期;14 d 和28 d 时凋亡率增加且比同时期对照组高(P < 0.05);60 d 时凋亡率再次降低;90 d 时凋亡率与对照组无明显差异。

[结论] 3-MA和雷帕霉素干预后, 染尘大鼠自噬活动强弱不同, 且与肺巨噬细胞的凋亡率呈负相关。

关键词: 三甲基腺嘌呤;  雷帕霉素;  肺巨噬细胞;  自噬;  凋亡 

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[基金项目] 国家自然科学基金(编号:81202161)

[作者简介]

[收稿日期] 2014-10-27

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